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32000538
简明基因工程原理
作者:贺淹才
中图分类:
生物科学
->分子生物学
出版日期:1998-4-1
主题词:基因-遗传工程
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内容简介
本书简明扼要介绍了分子遗传学的基本知识，基因工程的最新成就与前景，基因工程的基本过程，基因工程载体，酶切与连接，重组体DNA的导入与重组体转化子的鉴定，目的基因的表达与检测，克隆DNA的定向诱变，基因打靶技术，反义技术等内容。
目录
第一章 绪论
13
阅读
一、基因工程的概念
13
阅读
二、基因工程发展史
14
阅读
三、基因工程的巨大意义
15
阅读
四、生物技术与基因工程
16
阅读
五、我国的基因工程
21
阅读
六、基因工程的安全性问题
22
阅读
七、我国的《基因工程安全管理办法》
24
阅读
第二章 基因工程的流程
27
阅读
一、基因工程的基本步骤
27
阅读
二、基因工程的上游工程──基因克隆
27
阅读
三、基因工程的流程
28
阅读
四、基因工程下游工程的分化
28
阅读
五、原核细胞表达系统
30
阅读
六、植物基因工程
31
阅读
七、昆虫或动物细胞表达系统
33
阅读
八、动物基因工程
34
阅读
九、基因治疗
35
阅读
第三章 DNA的分子特性与利用
37
阅读
一、脱氧核糖核酸
37
阅读
二、DNA变性
38
阅读
三、复性与杂交
39
阅读
四、DNA的复制
40
阅读
五、DNA的修复
41
阅读
六、生物的基因重组
41
阅读
七、基因
42
阅读
八、基因表达及其调控
43
阅读
九、启动子和增强子
45
阅读
十、DNA的分离和提取
46
阅读
十一、基因突变
51
阅读
十二、转座子及基在基因工程中的应用
54
阅读
第四章 各种工具酶
57
阅读
一、工具酶与基因工程
57
阅读
二、限制酶
58
阅读
三、DNA聚合酶
63
阅读
四、DNA连接酶
66
阅读
五、S1核酸酶
67
阅读
六、Bal31核酸酶
67
阅读
七、碱性磷酸酶
68
阅读
八、逆转录酶
68
阅读
第五章 目的基因的制取
70
阅读
一、目的基因
70
阅读
二、鸟枪法
72
阅读
三、物理化学法
73
阅读
1.物理化学法分离基因的基本原理
73
阅读
2.物理化学法分离基因的主要方法
73
阅读
四、化学合成基因
74
阅读
五、酶促逆转录合成法
75
阅读
六、聚合酶链式反应
75
阅读
七、基因文库的概念
80
阅读
八、基因文为的大小
80
阅读
九、基因组文库
82
阅读
十、cDNA文库
84
阅读
第六章 基因载体的选择与构建
87
阅读
一 、基因克隆与基因重组
87
阅读
二、基因载体
87
阅读
三、载体的报告基因(标记基因)
88
阅读
四、细菌质粒载体
91
阅读
1.质粒的概念
91
阅读
2.质粒DNA的分子特性
91
阅读
3.质粒的复制和遗传
92
阅读
4.质粒的报告基因
93
阅读
5.质粒的转座子
94
阅读
6.质粒的改造
94
阅读
7.质粒载体的条件
94
阅读
8.质粒载体的多克隆位点
95
阅读
9.辨色鉴别重组克隆的质粒载体
96
阅读
10.常用的质粒载体
96
阅读
11.质粒DNA的提取
97
阅读
五、噬菌体载体
99
阅读
1.噬菌体和噬菌体载体的特点
99
阅读
2.λ噬菌体
100
阅读
3.溶菌性反应与溶源性反应
102
阅读
4.λ噬菌体的包装
103
阅读
5.野生型λ噬菌体的改造
104
阅读
6.单链噬菌体载体
107
阅读
7.粘性质粒载体
108
阅读
六、动物病毒载体
109
阅读
1.动物病毒载体的特点
109
阅读
2.杆状病毒载体
110
阅读
3.SV40载体
112
阅读
4.痘苗病毒载体
115
阅读
5.逆转录病毒载体
116
阅读
6.基他动物病毒载体
119
阅读
七、酵母质粒载体
119
阅读
1.酵母质粒载体的特点
119
阅读
2.整合载体
120
阅读
3.自我复制载体
120
阅读
4.酿酒酵母载体系统
121
阅读
第七章 酵母质粒载体(重组与克隆)
124
阅读
一、基因重组的概念
124
阅读
二、亚克隆
125
阅读
三、基因重组对载体的要求
126
阅读
四、连接前的处理
128
阅读
五、粘性末端连接
130
阅读
六、平端连接
133
阅读
七、人工接头连接
134
阅读
八、同聚物加尾连接
136
阅读
九、人生长激素基因的克隆
138
阅读
第八章 重组DNA导入受体细胞
144
阅读
一、克隆与导入方法
144
阅读
二、受体细胞
145
阅读
三、大肠杆菌宿主菌
145
阅读
四、受体细菌的感觉态
146
阅读
五、转化反应
147
阅读
六、磷酸钙沉淀法
149
阅读
七、体外包装转染法
150
阅读
八、共转化
151
阅读
九、电转化
153
阅读
十、微弹技术
154
阅读
十一、微注射技术
155
阅读
十二、脂质体导入法
156
阅读
十三、转化酵母菌
158
阅读
第九章 重组体的筛选
160
阅读
一、转化子与筛选的概念
160
阅读
二、筛选方法的类型
160
阅读
引言
160
阅读
1.快速细胞破碎法
161
阅读
2.煮沸法
162
阅读
3.基因定位法
162
阅读
4.DNA序列测定
168
阅读
5.依赖具有筛选性的载体
173
阅读
6.mRNA翻译检测
175
阅读
7.核酸探针与菌落原位杂交
175
阅读
8.Southern印迹杂交试验
179
阅读
9.免疫化学方法
179
阅读
10.酶免疫检测分析
184
阅读
第十章 目的基因的表达
186
阅读
一、基因工程的目的
186
阅读
二、制约目的基因表达的因素
186
阅读
三、阅读框架
187
阅读
四、启动子与转录的影响
187
阅读
五、翻译过程对表达的影响
189
阅读
六表达体系与表达产物的形式
191
阅读
七、大肠杆菌表达体系
192
阅读
八、人生长素基因在大肠杆菌中表达
193
阅读
九、构建分泌型表达载体
198
阅读
十、真核细胞表达体系的特点
199
阅读
十一、酵母表达体系
200
阅读
十二、昆虫或昆虫细胞表达体系
202
阅读
十三、哺乳动物细胞表达体系
204
阅读
十四、新型的胞浆表达体系
205
阅读
十五、表达检测系统
206
阅读
第十一章 克隆的策略
211
阅读
一、克隆方法的分类
211
阅读
二、用质粒载体进行克隆
214
阅读
三、用λ噬菌体进行克隆
216
阅读
四、用粘粒载体进行克隆
216
阅读
五、Northetn杂交法
217
阅读
六、cDNA文库筛选法克隆
218
阅读
七、杂交筛选法
219
阅读
八、磁珠捕捉法
220
阅读
九、产物导向法
222
阅读
十、岛屿获救PCR法
223
阅读
十一、NatI连锁片段筛选法
225
阅读
十二、外显子捕捉法与外显子扩增法
226
阅读
十三、动物园杂交法(zoo blot)
228
阅读
十四、剪接位点筛选法
228
阅读
十五、作图克隆法
229
阅读
十六、利用杂种细胞克隆法
232
阅读
十七、消减杂交法
233
阅读
十八、相同序列克隆法
235
阅读
十九、差异显示法
236
阅读
二十、显微切割与微克隆法
238
阅读
二十一、互补克隆法
239
阅读
二十二、插入诱变法
240
阅读
二十三、其他克隆方法
242
阅读
第十二章 克隆DNA的定向诱变
244
阅读
一、基因突变与人工诱变技术
244
阅读
二、缺失突变和插入突变
246
阅读
三、碱基置换
248
阅读
四、寡核苷酸的定向诱变
251
阅读
五、定向诱变与蛋白质工程
254
阅读
第十三章 基因打靶、遗传标记与检测
255
阅读
一、基因打靶技术
255
阅读
二、限制性性段长度多态性
259
阅读
三、随机扩增多态DNA技术
260
阅读
四、单链DNA构象多态性技术
261
阅读
五、扩增阻滞突变系统
262
阅读
六、表面呈现技术
265
阅读
七、原位DNA合成技术
268
阅读
八、连接酶链反应
269
阅读
九、双标记寡核苷酸捕获分析法
272
阅读
第十四章 反义技术与ribozyme的应用
273
阅读
一、反义寡核苷酸
273
阅读
二、反义技术的原理
274
阅读
三、ASON的改造与反义药物
275
阅读
四、核酶(ribozyme)
275
阅读
引言
275
阅读
1.ribozyme的克隆和应用价值
276
阅读
2.用于兽医和畜禽抗病育种
278
阅读
3.用于植物基因工程
279
阅读
4.用于基因治疗
280
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